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洋葱亚细胞***方法服务至上「多图」

发布时间:2022-08-29 21:17:26        







武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;2、MTR_8g079250的***表达构建PMTR_8g079250::GUS融合表达载体,通过农发根转化的方式转入蒺藜苜蓿根部,经培养后,进行GUS染色观察。公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。






目的研究1个白木香倍半萜合酶(ASS)的亚细胞***,确定其功能区域,并比较3种瞬时表达体系在亚细胞***研究中的优劣。方法从白木香愈伤***中提取总RNA,采用特异引物RT-PCR方法倍半萜合酶ASS***,并连接于pEZS-NL载体和pFGC5941GFP改造载体上,分别构建pFGC5941-GFP-ASS、pEZS-NL-ASS-GFP 2种植物表达载体,分别利用根***农侵染叶片、***轰击洋葱表皮细胞、PEG转化白木香原生质体3种技术进行瞬时转化表达,激光共聚焦显微镜下观察表达出的绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白的亚细胞***。结果在叶片表皮细胞、洋葱表皮细胞及白木香原生质体中,融合蛋白绿色荧光均能被观察到。花期的调控与植物的生物量有着密切的关系,在中国农业发展历史中,农业生产者通过打顶技术来控制作物的开花进而来提高作物的产量已在农业生产中发挥着重要的作用。ASS***与GFP的融合蛋白产物在叶片中***于胞质,在洋葱表皮中***于胞质和细胞核,白木香原生质体中***于胞质和质体。结论 ASS***在白木香原生质体胞质及质体***;对3种体系的结果比较表明,应用不同体系研究蛋白的亚细胞***可能出现不同的结果,这可能与同源或异源表达的植物细胞的特性有关。


武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;0cm2洋葱表皮的玻璃皿中,边振荡边加入10μLpCambia2301-GaMYB2-GFP质粒,逐步加入40μL0。公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。





植物细胞壁抗降解屏障是限制秸秆生物质资源化转化利用的关键因素,而木质纤维素的阿魏酸化是禾本科植物细胞壁抗降解屏障形成的重要分子基础。植物阿魏酰基转移酶(Feruloyl transferase)是负责将阿魏酸从阿魏酰CoA转移至阿拉伯木聚糖分子上的关键酶之一,在阿拉伯木聚糖与木质素的连接上起到关键作用,与植物细胞壁抗降解屏障的形成关系十分密切,因此对阿魏酰基转移酶***开展研究将可以为禾本科能源植物开发利用以及农作物秸秆的再生利用提供新的思路。本文对禾本科模式植物二穗短柄草(Brachypodium distachyon)中的一个可能的阿魏酰基转移酶***Bra1进行研究,其主要研究结果如下:1.以二穗短柄草成熟茎***mRNA为材料,采用RT-PCR技术得到了Bra1(5g14720)***的全长cDNA序列,其序列大小为1369 bp,生物信息学分析表明该***的开放阅读框(ORF)编码443个氨基酸残基,其编码蛋白质的理论分子质量为48.45 kDa。通过序列对比,发现水稻Os02g47210和Os03g37984是拟南芥AtPUT3的功能同源***。进一步的***原核表达以及蛋白质谱分析也表明该***的开放阅读框能正确编码一个BAHD酰基转移酶蛋白,其分子量大小与理论值基本一致。2.Bra1编码蛋白的氨基酸序列中包含有BAHD酰基转移酶家族特有的HXXXD功能区以及DFGWG保守结构域,说明Bra1***是BAHD酰基转移酶***家族的一个成员。


武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;其启动子序列包含TGACG-motif、ABRE、TCA-element、Box-W1、Wbox和BoxS等多个与胁迫相关的顺式作用元件。公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。






由稻瘟菌(Magnaporthe grisea)引起的稻瘟病是重要的水稻病害之一。以研究稻瘟菌致病***为中心,探讨致病相关***的种类及其功能,生理小种和致病***的关系,致病***的遗传分离和在群体中的转移规律等等,能够为水稻抗瘟性研究和稻瘟病化学防治、生物防治提供理论基础。 本研究利用在实验室已经建成的根***农介导的稻瘟菌T-DNA插入突变体库,挑选了7个致病力缺陷的突变体,提取***组DNA,PCR检测确认T-DNA的插入。2)是植物N素同化途径中较为关键的催化酶之一,被称为是植物中无机态N转化为有机态N的“门户”,对植物N素吸收、同化和利用效率(Nitrogenuseefficiency)有着极为重要的影响。利用DW-ACP-PCR(DNA Walking-Annealing Control Primer-PCR)技术对T-DNA右边界侧翼序列进行扩增,7个突变体都获得了特异条带。对这些特异条带进行并测序,其中5个测序成功,另外2个测序失败。将成功的序列与稻瘟菌***组和NCBI数据库比对,发现1个为载体pCAMBIA1300序列,4个与稻瘟菌的***组相似性达93%~99%,认为是T-DNA插入位点的侧翼序列。


武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;采用遗传转化技术获得了整合有拟南芥AtELHYPRP2(EARLI1-LIKEHYBRIDPROLINE-RICHPROTEIN2,AT4G12500)***的转***株系,研究了该***编码蛋白对***病原体赤霉菌的抗性及其亚细胞***特征。公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。





谷氨酰胺合成酶(GS; EC 6.3.1.2)是植物N素同化途径中较为关键的催化酶之一,被称为是植物中无机态N转化为有机态N的“门户”,对植物N素吸收、同化和利用效率(Nitrogen use efficiency)有着极为重要的影响。高等植物中的GS同工酶主要分为两类:胞质型GS1主要同化从土壤吸收的初级氨及再同化从植物体内各个N循环途径所释放的氨;质体型GS2同化由NO3--N还原而来及光呼吸过程所释放的氨。利用ROS荧光指示剂DCFH-DA,Ca2+荧光指示剂Fluo-3AM和NO荧光指示剂DAF-FMDA检测胞内ROS、Ca2+和NO水平,发现亚可诱导酵母胞内ROS,Ca2+和NO水平显著升高。N素供应对甜瓜的生长发育、果实的产量和品质形成有非常重要的影响,目前甜瓜N素代谢研究还停留在N营***理与果实品质及产量层面,在分子机理水平的研究报道很少,尤其是对与N素同化和利用效率紧密相关的GS酶***的研究还是空白。因此,本文以甜瓜作为对象,在从甜瓜中出胞质型GS***M-GS1的基础上,对M-GS1及课题组到的甜瓜质体型GS***M-GS2的***组拷贝数、表达产物的亚细胞***及生化特性、在甜瓜中的表达调控特征等进行了研究和对比分析,从***、蛋白质和细胞水平对甜瓜GS***进行了系统的功能验证和鉴定,开展了甜瓜N营养代谢的分子生理研究;进而在植株水平研究M-GS1在超量表达后提高植株N素同化效率的潜能,为甜瓜GS***的应用、利用GS***改良植物N素利用效率的研究提供新的材料和依据。


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