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多种探针标记检测系统

基于地高3辛、生物素和荧光标记分子的标记和检测系统是常见的原位杂交检测方法。

荧光标记检测常为直接探针标记方法，如在dUTP/UTP/ddUTP上连接Fluorescein后进行核酸标记。由于标记在核酸上的荧光分子必须经受杂交和洗脱过程中的考验，以及荧光分子易于衰减，其检测灵敏度受到一定的影响。但对荧光分子的直接检测呈现的背景较低。

使用分支DNA信号扩增的RNA FISH

Invitrogen? ViewRNA?和PrimeFlow?检测是使用分支DNA信号扩增 (bDNA) 来检测特异性信号的直接荧光RNA ISH方法。 使用***但兼容的信号扩增系统让RNA靶标的多重复用成为可能。 荧光RNA原位杂交检测分为四个主要步骤：样本制备、靶标杂交、信号扩增以及检测。 该方法可实现更高的特异性，更低的背景值和更高的信噪比。

显色原位杂交 (CISH)

显色原位杂交 (CISH) 能让您利用***学实验室中已经存在的方法在***形态学背景下获取遗传信息。 我们提供用于CISH分析的CISH DNA探针和关键***。

荧光原位杂交 (FISH)

多重荧光原位杂交 (FISH) 能让您利用单一样本同时检测多个靶标并直观显示共***情况。 使用不同光谱的荧光基团标记每种不同的杂交探针，这种方法能让您在单一样本中解析多种遗传成分或多***表达模式，并提供多色直观显示。

惰性多聚体可用来促进250个碱基以上的探针的杂交率。对单链探针可增加3倍，而对双链探针、随机剪切或随机引物标记的探针可增加高达100倍。而短探针不需用促进剂，因其复杂度低和分子量小 ，短探针本身的杂交率就高 。***葡聚糖是一种广泛用于较长双链探针杂交的促进剂。这是一种多聚胺，平均分子量为500 000。另一种常见的促进剂是聚乙二醇（PEG），PEG分子量小（6000～8000）、粘度低、价格低廉，但它不能完成取代***葡聚糖。在某些条件下5%～10%***葡聚糖效果较好，若用5%～10%PEG则可产生很高的本底。因此，使用促进剂时有必要优化条件。