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发布时间:2022-06-20 03:49:06
动物实验检测的取材要求介绍:
实验小鼠取材要求
采血后,立即将血液放入1.5mL离心管(不需加抗凝剂或防腐剂)。让血液在室温下静置30-60分钟。在相对离心力(relativecentrifugalforce,RCF)14000g下离心血样10-15分钟,用移液管吸取分离,并转移到干净的离心管中。可将样本在14000g下再离心2-3分钟,以分离任何剩余的红细胞。将分离好的转移到干净的离心管中。
原位杂交涉及的步骤:玻片的准备和样品固定,细胞或***的预渗透处理,靶DNA变性(DNA原位杂交),探针制备,原位杂交过程,杂交后洗涤,探针(显色)检测。
玻片的准备和样品固定
对于染色体涂片,1:1的乙醇/醚处理的载玻片已能符合要求。对于***切片的原位杂交,为了在实验过程中不丢失***样品,可使用多聚赖氨酸或铬矾明胶包被的载玻片。
样品的固定步骤是为了保持样品的原有形态学。样品固定是原位杂交中的步骤,从化学反应角度来看,固定剂的使用和选择对后续杂交的影响不会太大,因为核酸杂交的功能分子基团被安全地包裹在DNA双螺旋结构中,而交联剂的使用对RNA基本没有影响。对于染色体涂片,常使用/固定;石蜡包埋的***切片用固定。冷冻切片可通过在4%的甲醛溶液中固定30min,或使用Bouin固定剂。
肝纤维化动物模型
模型概述:
1. 任何可引起肝损伤的因素长期、反复作用于,均可产生肝细胞变性、坏死,继而肝和纤维***,导致肝纤维化。
2. 已有化学性损伤、性、生物学、酒精性和营养性肝纤维化模型。每种方法因致病因素不同,给药途径不同,产生的机理、纤维化出现早晚、稳定性、出现率、重复性及机体自然患病过程相似程度等都不尽相同。
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