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(1)75% (体积分数)酒精消毒孕鼠,在无菌条件下取出胎鼠,分离并切取脊髓,置于冷的无钙、镁的HBSS液的平皿中( 下置冰袋)。

(2)解剖显微镜无菌条件下仔细剥离脊膜及血管。

(3)用弹簧剪将脊髓剪成1cm3大小，消化液37℃消化15-20min，每五分钟振荡一次；

(4)去掉上清，加入终止液终止消化，吹打10-15次，不能有气泡，收集上清，剩余***再消化一次。

(5)4℃1000rpm离心10min，弃上清，加入种植液1重悬，培养箱内差速贴壁30min；

(6)收集上清，台盼蓝染色计数，按6*105cells/孔种入六孔板（种植液1），37℃，5%CO2，95%饱和湿度的培养箱中培养；

(7)培养第二天，全换液更换为种植液2；

(8)培养第四天，半量换液加入5uM的，24h全量换液；

(9)之后每周换液两次。

　***=150mMN***,15mM柠檬酸钠溶液(pH7.4)

　　HCl处理：对样本进行20-30min的200mMHCl处理，可将蛋白抽提，并将核酸序列进行一定程度的水解，增加杂交检测的信噪比。

　　去垢剂处理：如果对样品的固定、脱水、包埋等预处理过程不足以将脂膜成分***暴露核酸，可对样品进行额外的蛋白去垢剂处理(如TritonX-100和SDS)。

　　蛋白酶处理：样品中待杂交的核酸序列常与蛋白缠绕交联在一起，样品的固定步骤更是加剧了蛋白的交联程度，因此预渗透是核酸杂交前的常规步骤，通常通过蛋白酶K的消化作用来完成。根据不同的文献来源，蛋白酶K的工作浓度通常设为10-500μg/ml(溶解于20mMTris-HCl,2mMC***2,pH7.4,酶浓度可根据具体样品进一步优化)，对样品进行37°C7.5–30min的处理。染色体涂片或核片的蛋白酶K处理浓度可降至1μg/ml消化7.5min。也有文献指出，固定石蜡包埋的***切片样品，使用胃蛋白酶（500μg/ml，溶于200mMHCl）将得到较好的蛋白消化结果。

　它是伴随着生物***科学，通过漫长的动物实验过程形成的。但是，实验动物科学的迅速发展，使得实验动物的研究价值已经不于生物科学方面，而且广泛地与许多领域科学实验研究紧紧地联系在一起，成为保证现代科学实验研究的一个的条件。在很多领域的科学研究中，实验动物充当着非常重要的安全试验，效果试验、标准试验的角色。

  简单的说就是用各种动物当做实验的模型对象，来模拟人做科学研究的。比如说我们上学的时候都用过青蛙做实验，也有用鱼或者蚯蚓还有猫的，这些就是简单的一种造模了，通常来说在实验室里面用到的比较多的实验动物就是小白鼠了，这个我们大家都是有了解的。

用途有哪些 ：

      运用这种模技术的实验内容也是非常多的，具体的可以根据你要研究的不同科研项目来定，比如说你想实验一种因素如果作用在人类的身上会有什么影响或者造成什么效果的话，就可以先把这个因素作用在你要实验的动物身上，先观察一下具体反应，做好相关的实验记录，后在实验周期结束以后再观察一下实验动物的具体结果就可以了。比如说我们都知道小脑是支配我们***平衡能力的一个**系统，如果想实验这个理论的话，就可以用大头针对实验动物进行硬脑模穿刺，这样就可以摧毁动物的一侧小脑，等小脑被摧毁以后，你就可以看到实验的动物对象已经不能够维持基本的平衡了，会在桌子上不停的滚动，这个过程就是一个基本简单的实验动物造模。