植物***原位杂交电话「思特进」

武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；发育时间越短的胚胎越嫩，可以不用或者少用蛋白酶处理，发育时间长的胚胎就需要用蛋白酶来疏松***，以便于杂交。公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。

基本原理是荧光标记的核酸探针在变性后与已变性的靶核酸在退火 温度下复性；通过荧光显微镜观察荧光信号可在不改变被分析对象（即维持其原位）的前提下对靶核酸进行分析。

武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；FISH是原位杂交技术大家族中的一员，因其所用探针被荧光物质标记（间接或直接）而得名，该方法在80年代末被发明，现已从实验室逐步进入临床诊断领域。可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。

用于原位杂交的探针可以是单链或双链DNA，也可以是RNA探针。通常探针操作的长度以100-400nt为宜，过长则杂交率减低。近研究结果表明，寡核苷酸探针（16-30 nt）能自由出入***和***细胞壁，杂交效率明显高于长探针，因此，寡核苷酸探针和不对称PCR标记的小DNA探针或体外转录标记的RNA探针是***原位杂交优选探针。基本原理是荧光标记的核酸探针在变性后与已变性的靶核酸在退火温度下复性。

武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；杂交结束后，去除杂交液，立即于室温把滤膜放入大体积（300-500ml）的2×***和0。可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。

mFISH是在荧光原位杂交基础上发展起来的新技术，它不仅具有FISH的优点，而且克服了FISH的许多局限，其特点是可将多次繁顼的FISH实验和多种不同的******在一次FISH实验中完成。mFISH能同时检测多个***，分辨复杂的染色体易位和微小缺失，区分间期细胞多倍体和超二倍体等。mFISH用激发光谱和吸收光谱不同的荧光索按一定调色方法标记不同的探针，从而对不同靶DNA同时进行***和分析，并能对不同探针在染色体上的位置进行排序。***检测定义***检测：指通过***芯片等方法对被测者细胞中的DNA分子进行检测，并分析被检测者所含致病***、***易******等情况的一种技术。

武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；近研究结果表明，寡核苷酸探针（16-30nt）能自由出入***和***细胞壁，杂交效率明显高于长探针，因此，寡核苷酸探针和不对称PCR标记的小DNA探针或体外转录标记的RNA探针是***原位杂交优选探针。可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。

显色以下各步均在室温下进行。

（1）缓冲液I洗1min。

（2）用含2%正常羊和0.3％TritonX-100的缓冲液I孵育切片30min。

（3）用含1％正常羊和0.3％TronX-100的缓冲液I稀释羊抗Dig。

（4）将稀释液滴加在切片上，封口膜覆盖，湿盒内4℃孵育过夜。

（5）缓冲液I洗10min。

（6）缓冲液Ⅱ洗10min。

（7）加显色液，封口膜覆盖，避光室温孵育2～20h，随时镜检，当显色满意时入缓冲液Ⅲ终止显色。

显色液临用前配，其配方为：①NBT 45μl；②X-Phospllate液 35μl；③左旋咪唑      2.4mg；④缓冲液Ⅱ 加至10ml。

（8）常规脱水、透明、封固。

结果：杂交阳性信号为紫蓝色颗粒。